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      產(chǎn)品目錄

      百迪超級轉(zhuǎn)染試劑(替代Lipo6666)1ml

      品名: 百迪超級轉(zhuǎn)染試劑(替代Lipo6666)1ml
      型號: A524-100
      • 產(chǎn)品詳情
      • 規(guī)格參數(shù)

      產(chǎn)品信息

      適用范圍試劑
      使用方法一、細胞準備(以 24 孔板為例)
      貼壁細胞:轉(zhuǎn)染前一天,胰酶消化細胞并計數(shù),按照每孔 2-8×105個細胞的量進行鋪板,使 其在轉(zhuǎn)染時密度為 80-100%。
      懸浮細胞:轉(zhuǎn)染當天,配制 DNA 復(fù)合物之前,24 孔板中細胞鋪板,每 500μL 生長培養(yǎng)基中 加入 4-10×105 細胞。
      * 鋪板時可使用抗生素,但轉(zhuǎn)染時候切記移除抗生素。
      * 高細胞密度仍具高轉(zhuǎn)染效率,建議細胞密度大于 90%。
      二、轉(zhuǎn)染復(fù)合物的配置:
      1. 使用 50μL 無血清培養(yǎng)基(如 DMEM 或 Opti-MEM 培養(yǎng)基)稀釋 0.5μg DNA,渦旋混 勻。
      2. 使用 50μL 無血清培養(yǎng)基(如 DMEM 或 Opti-MEM 培養(yǎng)基)稀釋 0.6-2.5μL 轉(zhuǎn)染試劑。 轉(zhuǎn)染試劑稀釋后室溫孵育 2-5 min(在 30 min 內(nèi)同稀釋的 DNA 混合,保溫時間過長會 降低活性)。
      * 如果 DMEM 作為脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑的稀釋液,必須在 5 min 內(nèi)同稀釋的 DNA 混合。
      * 轉(zhuǎn)染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響,建議初次使用時設(shè)置梯度優(yōu)化最佳使用 量。
      三、細胞轉(zhuǎn)染:
      1. 混合稀釋的 DNA 和稀釋的轉(zhuǎn)染試劑(總體積 100μL),輕輕混勻,并在室溫孵育 20min。此時溶液可能會混濁,但不會影響轉(zhuǎn)染。DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物室溫至少穩(wěn)定保 存 5h。
      2. 將 100μL DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物滴加到 24 孔細胞板中(細胞板中培養(yǎng)基為 400μL),輕 輕晃動細胞板混勻。
      * 如需無血清條件轉(zhuǎn)染,加入復(fù)合物前將含血清培養(yǎng)基替換為無血清培養(yǎng)基即可。 3. 37℃,5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 18-48 h,直至進行轉(zhuǎn)基因表達分析,無需去掉復(fù)合物或更換 培養(yǎng)基。如需要,可在轉(zhuǎn)染后 4-6 h 后更換生長培養(yǎng)基,不會降低轉(zhuǎn)染效率。
      注意事項1. 本產(chǎn)品可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染,并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基。但是,制備轉(zhuǎn)染復(fù)合 物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑,因為血清會影響復(fù)合物的形成。
      2. 高細胞密度仍具高轉(zhuǎn)染效率,建議細胞密度大于 90%,有利獲得更高的蛋白表達。
      3. 鋪板時可使用抗生素,但轉(zhuǎn)染時應(yīng)換液將抗生素移除。
      4. 使用高純度的 DNA 或 RNA 有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率,并去除內(nèi)毒素。
      5. 本產(chǎn)品置于 4 度保存,不可冷凍。避免反復(fù)或長時間開蓋,避免脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效 率。
      6. 初次使用建議優(yōu)化 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑用量以獲得最佳轉(zhuǎn)染效率。DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的比例, 通常推薦是 1:2-1:3,例如使用 0.5 μg DNA 和 1-1.5 μL 轉(zhuǎn)染試劑。可根據(jù)試劑情況進行 優(yōu)化調(diào)整。
      聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
      保存條件2-8℃保存,有效期 24 個月。

      產(chǎn)品詳情

      BDBIO 超級轉(zhuǎn)染試劑(替代 Lipo6666)是一種新型高效的陽離子聚合物。它可以與核酸 (包括質(zhì)粒、siRNA、寡聚核苷酸)相互作用形成一種復(fù)合物將核酸轉(zhuǎn)運到真核細胞內(nèi),適 用于大部分真核細胞的細胞轉(zhuǎn)染,對難轉(zhuǎn)染細胞表現(xiàn)出更大優(yōu)勢。本產(chǎn)品細胞毒性低,轉(zhuǎn)染 后可不換液,也可在 4-6 小時后更換新鮮培養(yǎng)基。對高密度細胞保持高轉(zhuǎn)染效率,在細胞密 度 90%以上仍具有很高的轉(zhuǎn)染效率。血清不影響轉(zhuǎn)染效率,可將轉(zhuǎn)染復(fù)合物直接加入完全培 養(yǎng)基中,可減少去除血清對細胞的損傷。用量少,通常情況下對于 24 孔板轉(zhuǎn)染,每次用 1- 2μL,1mL 可做 500-1000 次轉(zhuǎn)染;對于 6 孔板,每次用 4-8μL,1mL 約可做 125-250 次 轉(zhuǎn)染。


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