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      產品目錄

      百迪MSC無血清基礎培養基500ml

      品名: 百迪MSC無血清基礎培養基500ml
      型號: S101-500
      • 產品詳情
      • 規格參數

      產品信息

      適用范圍試劑
      使用方法UC-MSC 原代培養(組織塊法)
      1. 配制 MSC 完全培養基,MSC 無血清培養基:MSC 培養基添加劑:青鏈雙抗=500ml:25ml:5ml,4℃保存,2 周內使用。
      2. 無菌條件下取新鮮臍帶,用 DPBS 漂洗凈血跡。一般臍帶取得環境非無菌,可以稍微用75%酒精潤洗。
      3. 置于 10 cm 培養皿中,剪成 1~2cm 臍段,剔除血管,用 DPBS 洗凈血跡,再剪成 1mm3 組織塊。
      4. 用無菌滴管吸取少量細小組織塊均勻散布在 6 孔板 2 個孔中。
      5. 37℃,5%CO 培養箱孵育 30min,以使組織塊粘貼在培養皿壁上。
      5. 向每孔滴加 0.8 ml 完全培養基(注意沿孔壁小心滴加,勿使沖動組織塊)。
      6. 37℃,5% CO2 培養箱孵育過夜,次日(D1)每孔再補加 1 ml 完全培養基。
      7. 37℃,5% CO2 繼續培養,5 天(D6)后半量換液(此時一般看不到細胞,但最快 3 天就可看到細胞從組織邊沿爬出)。
      8. 再過 5 天后半量換液(此時一般會有細胞爬出,但最晚可到 14 天會出現細胞從組織邊沿爬出)。
      9. 每 2 天換一次培養液,繼續培養 2~4 天,待細胞密度達到約 80%后傳代培養。
      注意事項:組織塊培養的關鍵是要保障組織塊始終貼壁,換液動作要盡可能輕微,避免沖動組織塊。培養基加量不能太多,以免組織塊漂浮。
      UC-MSC 傳代培養與凍存
      1. 待細胞融和度達到約 80%后進行傳代(細胞不能太密集,否則容易分化),吸棄孔板中的培養基,每孔加適量 DPBS 輕輕沖洗 1 次。
      2. 根據培養皿適量加入重組胰酶-EDTA,在 37℃,5% CO2 培養箱作用 3~5 min(可輕拍培養瓶幫助細胞脫落)。
      3. 顯微鏡下觀察細胞完全脫落后,使用 5ml MSC 無血清基礎培養基,1000 rpm 離心 3~5 min。
      4. 謹慎吸出上清,細胞團塊用適當體積的完全培養基懸浮后,混勻細胞懸液。
      5. 按照所需的比例進行傳代或按照 7000-8000cells/cm2 的細胞密度將細胞接種至培養器皿中,放入 37℃,5% CO2 培養箱內培養。
      6. 每 2-3 天更換一次培養基,待細胞融合度達到 80%左右時,參照上述操作步驟 1~5 做細胞傳代;或者參照操作步驟 1~3 收獲細胞凍存。
      7. 細胞凍存:將細胞團塊懸浮于適量無血清干細胞專用凍存液(無酚紅)中,裝入凍存管,2~8℃冰箱放置 30 min,-80℃冰箱放置 24 h,轉入液氮罐凍存。
      注意事項1. MSC 無血清基礎培養基和添加劑在室溫或 2-8℃解凍,避免反復凍融。
      2. 本產品啟封前若有少量細小的凝聚物,是培養基成分的析出,屬于正常現象,可輕輕混勻后使用;
      3. 使用本產品時應嚴格按照無菌操作的規程進行操作;
      聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
      保存條件4℃

      產品詳情

      BDBIO 間充質干細胞(MSC)培養基是一款無血清、無異源成分的培養基,用于多種來源(即骨髓、脂肪組織、臍帶組織和牙髓) 間充質干細胞的生長和擴增,支持 MSC 的長期生長,同時保持其自我更新和多譜系分化潛力。


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