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      產品目錄

      百迪CHO添加物100ml

      品名: 百迪CHO添加物100ml
      型號: S1121-100
      • 產品詳情
      • 規格參數

      產品信息

      適用范圍試劑
      使用方法
      細胞傳代:
      1. 37℃水浴預熱 CHO 無血清完全培養基;
      2. 從培養箱中取出搖瓶,取少量細胞懸液進行細胞密度及活力檢測;
      3. 按照密度為3-5×105/ml個細胞接種至新的搖瓶中,置于37℃、CO2含量為5%-8%的培養箱中,搖床( 振幅50mm,轉速110-120rpm)上培養。
      4. 當活細胞密度≥4×106時進行傳代,使用新鮮CHO無血清培養基按3-5×105/ml重懸細胞,并將細胞接種至新搖瓶。
      培養基適應(大部分情況不需要):
      直接適應
      1. 將細胞直接稀釋到預熱的CHO培養基中,活細胞密度為3-5×105/ml,轉移到合適的培養容器中。
      2. 置于培養箱,監測細胞生長情況。如果使用直接適應法觀察到細胞生長不理想,則使用順序適應法。
      順序適應
      1. 細胞以3-5×105/ml 的密度接種至含1/3 CHO無血清培養基和2/3原培養基的培養瓶中,置于37℃、5%-8% CO2培養箱中培養。
      2. 當細胞密度達到4×106/ml,以3-5×105/ml 的密度進行傳代,接種至含2/3 CHO無血清培養基和1/3原培養基中培養。
      3. 當細胞密度達到4×106/ml,以3-5×105/ml個活細胞密度進行傳代,接種至含100%CHO無血清培養基中培養。
      4. 使用100% CHO無血清完全培養基繼續傳代幾次后,活細胞數應超過4×106/mL,培養4-6天存活率≥90%,此時被認為培養基適應已經完成。
      瞬時轉染:
      1. 在瞬轉開始之前,細胞應完全適應CHO無血清培養基,CHO細胞生長狀態正常,傳代倍增時間穩定(一般20-24h),細胞活率維持95%以上,方可進行瞬轉測試。
      2. 配置DNA-PEI 核酸-轉染試劑復合物(DNA:1.5mg/L,PEI:7.5mg/L),室溫孵育15-20min。
      3. 轉染時調整活細胞密度為6 x106 cells/ml(離心去掉舊培養液,改用新培養基最佳),并在Day1加入1.5mM 丙戊酸鈉。轉染之后的整個培養過程中,應該密切注意細胞活率和密度,在Day1-3-5-7-9-11添加5%補料進行高密度高產量表達,葡萄糖按需添加。
      4. 當細胞活率低于80%,培養結束,收取上清液,純化目標產物。
      5. (培養過程中參數建議如下:初始培養溫度36.5℃,Day1溫度降低至32~33℃,pH:7.1±0.2,DO:40%。搖床轉速120rpm,振幅50mm, 5-8%CO2 )。
      注意事項
      1. 液體細胞培養基應置于2~8℃避光保存。
      2. 針對不同的細胞株,由于代謝或對營養物質的需求不同,需要針對性的優化補料量,以更好的提高表達量。
      聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
      保存條件2-8℃避光儲存,有效期12個月。

      產品詳情

      中國倉鼠卵巢細胞(CHO)是目前生物工程上廣泛使用的細胞,是表達復雜生物大分子的理 想宿主,在醫藥研發治療性蛋白生產中發揮著非常重要的作用。BDBIO CHO 無血清培養基 是一款無血清、無動物源成分的培養基,包括各種高性能、現成的 CHO 細胞系培養基和添 加物,是應用 CHO-DG44、CHO-K1、CHO-S 和 CHO-GS 等細胞系進行蛋白質生產的理 想材料。


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