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      產(chǎn)品目錄

      百迪骨髓細(xì)胞培養(yǎng)基100ml

      品名: 百迪骨髓細(xì)胞培養(yǎng)基100ml
      型號: S202-100
      • 產(chǎn)品詳情
      • 規(guī)格參數(shù)

      產(chǎn)品信息

      適用范圍試劑
      使用方法【適用儀器】
      顯微鏡、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機。
      【樣本要求】
      新鮮骨髓穿刺液效果最佳,若樣本無法立即接種,將樣本放于2℃-8℃保存,并于3天內(nèi)接種, 超過3天將影響培養(yǎng)效果。
      【檢驗方法】
      1. 接種:每5ml或10ml培養(yǎng)基中加入0.2-0.8ml的骨髓穿刺液樣本,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶使樣本 與培養(yǎng)基充分混合。
      2. 培養(yǎng):置于37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時。
      3. 終止培養(yǎng):向每個培養(yǎng)瓶中加入秋水仙素溶液,始終濃度為0.05-0.1μg/ml,輕輕搖勻后, 放入培養(yǎng)中靜置1-2小時。
      4. 收獲細(xì)胞:將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心管中,1500rpm離心10分鐘。
      5. 低滲:棄去上清液,加入37℃預(yù)溫的0.075 mol/L的KCl低滲液8-10ml,混勻使細(xì)胞重 新懸浮,37℃孵化25-35分鐘。
      6. 預(yù)固定:以冰醋酸:甲醇=1:3的比例配置固定液。每個離心管中加入1-2ml的固定液, 充分混勻后1500rpm離心10分鐘。
      7. 固定:棄去上清,每個離心管中加入8ml的固定液,充分混勻后靜置20-30分鐘,隨后 1500rpm離心10分鐘。
      8. 再次固定:棄去上清,每個離心管中加入8ml的固定液,充分混勻后靜置10分鐘,隨后 1500rpm離心10分鐘。并重復(fù)該步驟一次。
      9. 制片:將固定后的細(xì)胞懸液調(diào)至合適的濃度滴于用冰水預(yù)冷的載玻片上,每張載玻片上 滴2-3滴,可通過酒精燈外延5-6秒或者用口輕輕吹散。放入80℃烤箱中烤片2~3小時, 或50℃過夜烤片。
      10. 染色體分帶:玻片從烤箱中取出,室溫冷卻后可進行G顯帶和R顯帶分型,吉姆薩染液染 色后顯微鏡下觀察進行染色體核型分析。
      【陽性判斷值或者參考區(qū)間】
      細(xì)胞倍增指數(shù)大于2
      【檢驗結(jié)果的解釋】
      1. 固定液每次使用必須新鮮配制,否則將會形成酯類,形成背景較為明顯,從而影響制片 效果;
      2. 當(dāng)遇到經(jīng)過多次放療、化療和藥物治療的病人,重復(fù)兩次標(biāo)本都缺乏有絲分裂相,可能 是病人本身原因造成的。
      3. 細(xì)胞培養(yǎng)時間、加入秋水仙酰胺的量以及低滲操作時間會影響樣品制備效果,需要根據(jù) 實際樣本及實驗條件進行適當(dāng)調(diào)整。
      【檢驗方法的局限性】
      僅用于培養(yǎng)骨髓細(xì)胞。
      注意事項1. 細(xì)胞密度以2×106/ml左右為宜。
      2. 短期內(nèi)可放4-8℃保存,若長期儲存,應(yīng)放-10℃至-20℃保存,不可反復(fù)凍融。
      3. 本產(chǎn)品只用于體外診斷,操作過程應(yīng)避免污染;操作人員在檢驗時應(yīng)做好防護,預(yù)防疾 病傳播。
      4. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。
      5. 溶液應(yīng)為澄清,如有沉淀物,嚴(yán)禁使用。
      6. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。
      聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
      保存條件培養(yǎng)基應(yīng)在-20℃避光儲存,有效期為24個月。

      產(chǎn)品詳情

      主要組成成分:RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清、抗生素、肝素鈉、碳酸氫鈉、純化水。
      檢驗原理:新鮮骨髓樣本在骨髓細(xì)胞培養(yǎng)基中短暫培養(yǎng)后,加入有絲分裂抑制劑,使細(xì)胞有絲分裂停留 在中期,通過染色體顯帶技術(shù)對染色體進行分析、比較、排序和編號,判定是否存在染色體 數(shù)目或形態(tài)結(jié)構(gòu)異常,從而在一定程度上診斷染色體疾病。


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