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      產品目錄

      百迪小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 1×106cells/T25培養瓶

      品名: 百迪小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 1×106cells/T25培養瓶
      品牌: 百迪生物
      型號: C5102
      • 產品詳情
      • 規格參數

      產品概述

      來源顱頂骨
      形態貼壁、成纖維樣
      培養a-MEM培養基+10%FBS 37℃ 5%CO2
      傳代0.25%胰蛋白酶消化2-3min,比例1:2-1:4
      產品簡介MC3T3-E1細胞在含有抗壞血酸的培養基中生長后,選擇亞克隆用于高或低成骨細胞分化和礦化,獲得了MC3T3-E1 Subclone 4、MC3T3-E1 Subclone 14、MC3T3-E1 Subclone 24、MC3T3-E1 Subclone 30等多個亞系。MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14在抗壞血酸和3-4mM無機磷酸鹽中生長表現出高水平的成骨細胞分化,10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(ECM)。MC3T3-E1 Subclone 24和MC3T3-E1 Subclone 30在抗壞血酸中生長表現出很差的成骨細胞分化,不形成ECM,可以作為MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14的陰性對照。礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA及唾液酸糖蛋白(BSP)、骨鈣素(OCN)和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關蛋白受體的mRNA。高或者低的分化潛能的亞克隆在培養中生產出相似數量的膠原質,表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1(成骨細胞相關轉錄因子)。植入免疫缺陷小鼠以后,高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨,低分化細胞只是產生纖維組織。這些細胞系是研究體外成骨細胞分化的好模型,尤其是ECM信號,它們和原代培養顱頂成骨細胞的行為類似。
      收貨指南
      培養方法對于懸浮細胞:
      1. 若離心對細胞影響不大,可將細胞懸浮液收集在試管中;
      2. 150x g離心5分鐘,棄上清;
      3. 加入新鮮培養液,按1∶2或1∶3的比例分裝到2或3個培養瓶中(具體情況視細胞生長速度及密度決定);
      或:
      1. 若離心對細胞影響大,培養瓶直立靜置半小時左右,待大部分細胞都沉降到細胞瓶底,吸出1/2~2/3的舊培養基;
      2. 加入新鮮培養液,按1∶2或1∶3的比例分裝到2或3個培養瓶中(具體情況視細胞生長速度及密度決定),再逐瓶加入新鮮培養基。
      對于貼壁細胞:
      1. 盡量吸干凈T25瓶原培養基;
      2. 加3-4mL 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
      3. T25瓶加1mL左右胰酶,輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
      4. 將培養瓶放入37度培養箱消化;
      5. 消化到細胞間隙變大,但未完全脫落時加2-3mL完全培養基終止胰酶消化;
      6. 混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
      7. 加新的完全培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
      8. 補足完全培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養。
      生物安全等級1請在無菌環境中操作,避免污染;為了保護細胞的穩定性,細胞傳代次數不宜過多;為了結果的可靠性,實驗前請確認細胞狀態良好;嚴格遵守生物安全操作規程。
      免責聲明本產品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規,自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書,并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息,請與我們聯系。

      產品詳情


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