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      產品目錄

      百迪大鼠垂體瘤細胞 1×106cells/T25培養瓶

      品名: 百迪大鼠垂體瘤細胞 1×106cells/T25培養瓶
      品牌: 百迪生物
      型號: C5528
      • 產品詳情
      • 規格參數

      產品概述

      來源垂體
      形態上皮細胞樣,圓形
      培養Ham's F-12K+15%HS+2.5%FBS+1%P/S 37℃ 5%CO2
      傳代0.25%胰蛋白酶消化2-3min,比例1:2-1:4
      產品簡介1 請在無菌環境中操作,避免污染;為了保護細胞的穩定性,細胞傳代次數不宜過多;為了結果的可靠性,實驗前請確認細胞狀態良好;嚴格遵守生物安全操作規程。
      收貨指南1. T25細胞瓶到貨后處理方案:
      (1) 驗貨:培養瓶上標簽、培養瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
      (2) 處置:75%酒精對培養瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養箱靜置培養2-4小時后,進行顯微觀察、拍照,作為售后維權依據;
      (3) 注意:貼壁細胞在運輸過程中發生細胞脫落,這是正常現象,靜置后可恢復貼壁。
      2. 凍存管到貨后處理方案:
      (1) 驗貨:包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性;
      (2) 處置:盡快復蘇(見培養方法)或程序降溫后轉移至液氮中保存。
      培養方法1. 培養基:
      81.5% F-12K培養基;15% 馬血清(HS);2.5%胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉素(P/S)。
      2. 復蘇:
      (1) 解凍:用鑷子將凍存管浸于37℃水浴中;反復搖晃,迅速完成解凍;
      (2) 離心:噴灑75%酒精消毒后,在無菌環境下,打開凍存瓶,用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養基的10 mL離心管中,室溫1500 rpm離心3-5 min,細胞沉于離心管底部;
      (3) 培養:將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養基,輕柔懸起細胞,然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養基的T25培養瓶中,于37℃,5% CO2培養箱中培養;
      (4) 觀察:每日觀察細胞生長狀態(培養基顏色、細胞貼壁情況、形態與密度等)并拍照。
      3. 傳代:
      細胞密度達80%-90%開始傳代
      懸浮細胞:
      收集細胞,1500 rpm離心3-5 min,無菌下棄上清液,加1 mL完全培養基懸起細胞。
      貼壁細胞:
      (1) 清洗:無菌下吸出培養基,用37℃預熱的PBS清洗一次;
      (2) 消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,轉動培養瓶令其浸潤所有細胞,室溫(或37℃)消化,顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回超凈臺,輕敲幾下培養瓶后加1 mL完全培養基終止消化;
      (3) 離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中,1500 rpm離心3-5 min,無菌下棄上清液,加1 mL完全培養基懸起細胞。
      將收集的懸浮細胞和貼壁細胞混合均勻并移至T25培養瓶中,按1:2-1:3比例添加完全培養基,用移液器輕柔吹勻后,分裝至培養瓶中,于37℃,5% CO2培養箱中培養。
      生物安全等級1請在無菌環境中操作,避免污染;為了保護細胞的穩定性,細胞傳代次數不宜過多;為了結果的可靠性,實驗前請確認細胞狀態良好;嚴格遵守生物安全操作規程。
      免責聲明本產品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規,自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書,并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息,請與我們聯系。

      產品詳情


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