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TaKaRa 細(xì)菌16S rDNA PCR擴(kuò)增試劑盒

品名： TaKaRa 細(xì)菌16S rDNA PCR擴(kuò)增試劑盒: 品牌： TaKaRa; 型號(hào)： RR176

產(chǎn)品詳情
規(guī)格參數(shù)

商品名稱：TaKaRa 16S rDNA Bacterial Identification PCR Kit
商品編號(hào)：SPU2021051513
上架時(shí)間：2022-01-05

■ 制品內(nèi)容 (50 次量)

PCR Premix*500 μl × 3 支PCR primers: Forward primer (20 pmol/μl)30 μl × 1 支 Reverse primer1 (20 pmol/μl)30 μl × 1 支 Reverse primer2 (20 pmol/μl)30 μl × 1 支Seq primers: Seq forward (10 pmol/μl)20 μl × 1 支 Seq internal (10 pmol/μl)20 μl × 1 支 Seq reverse (10 pmol/μl)20 μl × 1 支Positive Control DNA (1 ng/μl )10 μl × 1 支16S-free H2O1 ml × 3 支 * PCR Premix中含有TaKaRa Ex Taq、反應(yīng)用Buffer、dNTP Mixture等，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融。

■ 制品說明

本試劑盒是PCR擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA的試劑盒，通過進(jìn)一步對(duì)PCR擴(kuò)增的DNA片段進(jìn)行序列分析，可以鑒定被檢測(cè)細(xì)菌的種類。細(xì)菌的rRNA是細(xì)胞內(nèi)含量最多的RNA，約占RNA總量的80%以上，其分子量大，種類多，由高度保守區(qū)和可變區(qū)組成。細(xì)菌的rRNA包括5S、16S、23S，其中5S rRNA信息量少，不適合分析。23S rRNA盡管分子大，信息量多，但堿基突變速度較快，同樣不適用于細(xì)菌鑒定。相比之下16S rRNA的遺傳較為穩(wěn)定，長(zhǎng)度在1,550±200 bp左右，代表信息量適中，是研究系統(tǒng)進(jìn)化的好材料。目前已經(jīng)報(bào)道了10,000種以上的細(xì)菌16S rDNA序列。通過對(duì)16S rDNA的序列分析，可以將細(xì)菌劃分到屬或種。16S rDNA可以通過PCR法擴(kuò)增獲得，由于16S rDNA的兩端較為保守，可以在這段保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增鑒定細(xì)菌的16S rRNA基因，然后進(jìn)行DNA測(cè)序，再將其DNA序列與GenBank中的已知序列進(jìn)行同源性比較后，可以判定檢測(cè)細(xì)菌的種類。本試劑盒中包含了進(jìn)行細(xì)菌16S rDNA PCR擴(kuò)增的所有試劑，同時(shí)還提供了三條測(cè)序用引物(正向測(cè)序引物Seq forward、反向測(cè)序引物Seq reverse、中間測(cè)序引物Seq internal)。PCR擴(kuò)增引物可以擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA前500 bp的DNA片段(Forward primer/ Reverse primer1)，以及全序列的DNA片段(Forward primer/ Reverse primer2)。16S rDNA的前500 bp 序列變化較大，包含有豐富的細(xì)菌種屬的特異性信息，進(jìn)行DNA測(cè)序時(shí)一個(gè)測(cè)序反應(yīng)即可測(cè)通，是一種較為經(jīng)濟(jì)便捷的16S rDNA鑒定方法；如果前500 bp序列不足以反映細(xì)菌的種屬信息時(shí)，則可以進(jìn)行16S rDNA的全序列PCR擴(kuò)增及DNA測(cè)序，得到較為全面的16S rDNA序列信息。對(duì)于難以培養(yǎng)、生化反應(yīng)不明顯及傳統(tǒng)表型方法不能鑒定的細(xì)菌，使用本試劑盒鑒定未知細(xì)菌種類尤為方便。 ■ 保存-20℃保存，使用時(shí)請(qǐng)于冰中融化。

■ 注意事項(xiàng)

1. 操作注意。
① 本實(shí)驗(yàn)所使用的試劑極易污染，實(shí)驗(yàn)盡可能在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行。
② 實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)穿無細(xì)菌污染的實(shí)驗(yàn)服，戴口罩和手套，預(yù)先用70%乙醇對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行消毒等。
③ 實(shí)驗(yàn)應(yīng)使用專用的儀器和耗材，例如：專用的微量移液器及配套的槍頭。開啟Microtube要小心，防止污染等。
2. PCR Premix 的使用方法。
PCR Premix中含有TaKaRa Ex Taq，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融。
3. 實(shí)驗(yàn)用細(xì)菌應(yīng)為純菌，以確保實(shí)驗(yàn)的可信度。

TaKaRa16SrDNABacterialIdentificationPCRKit
品牌	CodeNo.	產(chǎn)品名稱	包裝量
Takara	RR176	TaKaRa16SrDNABacterialIdentificationPCRKit	50次

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